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技術文章
2019-1111
小鼠子宮頸癌細胞胞培養步驟培養基及培養凍存條件準備1)準備DMEM培養基(DMEM,GIBCO,貨號11965-092),90%;胎牛血清,10%2)培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37C,培并箱濕度為709%-80%。凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存有1mlL細抱縣液的凍存管迅速放入37C水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖売解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,...
查看更多2019-119
按以下操作可避免血清沉淀的產生：1、解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發生。2、血清分裝凍存時，須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一。3、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。4、勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發生沉淀。5、勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中許多較不穩定的成份也會因此受到破壞，從而影響血清的品質。6、若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃...
查看更多2019-118
一、大鼠神經元細胞（酶消化法）簡述：新生24h或E18胎鼠，取腦，剝離海馬，剪碎，木瓜酶消化，清洗過篩后鋪于多聚賴氨酸包被的培養板中。二、大鼠雪旺細胞（植塊法）簡述：新生24h大鼠，取坐骨神經，剝去外膜和束膜，剪成1mm3的小塊，均勻鋪于培養皿內，加少量血清，37℃CO2培養2h后，再加入培養基，24-48h后有細胞爬出。三、大鼠胰島（酶消化加密度梯度離心）簡述：SD大鼠，常規麻醉、固定、消毒、進腹、膽總管插管，逆行注入預冷的１mg/ml膠原酶P溶液10ml。迅速取下胰腺，3...
查看更多2019-116
2019-114
細胞培養所用玻璃及塑料制品的清洗與消毒清洗在組織細胞培養中，體外細胞對任何有害物質都非常敏感。微生物產品附帶雜物，上次細胞殘留物及非營養成分的化學物質，均能影響培養細胞的生長。因此對新使用玻璃器皿和重新使用的培養器皿都要嚴格*的清洗，且要根據器皿的組成材料不同，選擇不同的清洗方法。玻璃器皿的清洗組織細胞培養中，使用量大的是玻璃器皿，故工作大的是玻璃器皿的清洗。一般玻璃器皿的清洗包括浸泡、刷洗、浸酸和沖洗四個步驟。清洗后的玻璃器皿不僅要求干凈透明無油跡，而且不能殘留任何物質。（...
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