技術文章
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技術文章
2019-1213
細胞(stem-cell)即為起源細胞,是指尚未發育成熟的細胞,它具有多分化潛能和自我復制的功能,在特定條件下,可以分化成不同的功能細胞,形成多種組織和器官。這是繼藥物治療和手術治療后有又一場醫療革命,被稱之為醫學上的奇跡。根據其分化潛能不同,可分為全能干細胞、多能干細胞、單能干細胞。1、全能干細胞:具有自我更新和分化形成任何類型細胞的能力,有形成完整個體的分化潛能,如胚胎干細胞,目前許多研究工作都是以小鼠胚胎干細胞為研究對象展開的,在生產克隆動物、轉基因動物、等方面都有重要...
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2019-1212
1、澳洲源胎牛血清內毒素檢測:凝膠法和動態濁度法要求內毒素含量≤10EU/ml。2、化學檢定:包括滲透壓(240~340)、pH(7.0~8.0)、總蛋白含量(3.5~5.0%)、血紅蛋白(≤0.02%)。3、澳洲源胎牛血清微生物檢查:細菌和真菌——直接培養法、噬菌體——噬斑法和增殖法支原體——培養法和DNA染色法、牛病毒——細胞培養法。要求均為陰性。4、促細胞生長測定:(SP2/0-Ag14標準規定)a.大增殖濃度≥1.0×106個/ml、倍增時間≤20小時克隆率=(陽性孔...
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2019-122
本文以RFectPlasmidDNATransfectionReagent(RFect質粒DNA轉染試劑盒),作為攜帶質粒穿膜的載體物質,具體介紹DNA轉染方法。圖.用本產品4ul轉染1ugpEGFP-C2質粒到293T細胞后,綠色熒光蛋白的表達情況。貼壁/懸浮細胞瞬時轉染-RFect質粒DNA轉染方法步驟:一、貼壁/懸浮細胞瞬時轉染操作流程(以24孔板轉染為例)A.細胞接種:1.轉染前24小時左右對細胞進行轉接,接種密度約為每孔0.3~1×105個細胞;2.過夜培養。B.R...
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2019-1123
1、盡可能地減少血清凍融次數。2、培養基無需37℃水浴。3、培養基保持PH值7.0-7.2。4、嚴格控制配制培養基的水質,容器定期刷洗。5、掌握細胞傳代的時機,細胞切勿生長過老。6、一旦您在細胞培養的過程中發現有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養基是否混濁。7、然后,在鏡下觀察細胞培養生長的狀態,黑點是否游動。8、如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養基就會迅速變黃、變混濁。9、如果在鏡下觀察細胞,生長狀態良好,與黑點出現前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現可能與以下幾種情況...
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2019-1122
實驗原理脂質體(LR)試劑是陽離子脂質體DOTMA和DOPE的混合物(1:1)。它適用于把DNA轉染入懸浮或貼壁培養細胞中,是目前條件下方面的轉染方法之一。轉染率高,優于磷酸鈣法,比它高5-100倍,能把DNA和RNA轉染到各種細胞。用LR進行轉染時,首先需要優化轉染條件,應找出該批LR對轉染某一特定細胞適合的用量、作用時間等,對每批LR都要做。先要固定一個DNA的量和DNA/LR混合物與細胞相互作用的時間,DNA可從1-5ug和孵育時間6h,開始,按這兩個參數繪出相應LR需...
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