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更新時間:2026-05-08
廠商性質:經銷商
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伯樂電穿孔儀1652100價格
在分子生物學與基因工程研究中,將外源DNA、RNA或蛋白質高效導入宿主細胞,是獲取重組蛋白、構建工程菌株以及開展合成生物學研究的基礎前置環節。伯樂電穿孔儀1652100作為Bio-RadMicroPulser系列的緊湊型微生物系統,以200–3,000V的可調電壓、指數衰減波輸出以及10組預置的微生物優化程序,為大腸桿菌、釀酒酵母、乳酸菌等多種工業與模式菌株的快速電轉實驗提供了高重復性的設備支持。該儀器摒棄了傳統化學法與病毒載體的復雜流程,通過短時高壓電場物理擊穿細胞膜形成瞬時“納米孔",在保持較高細胞活率的同時完成外源分子的胞內遞送。
選擇伯樂電穿孔儀1652100,意味著為您的細菌和酵母基因導入工作選擇了一套專為微生物優化、操作便捷且經得起實驗驗證的專業電轉化工具。
一、核心原理:瞬時高壓電場觸發可逆性成孔
伯樂電穿孔儀1652100的工作原理基于細胞膜在瞬態強電場下的電穿孔效應。當細胞與外源DNA共同置于電擊杯中,儀器通過高精度電容放電,在毫秒級別內釋放高于1,000V的指數衰減波脈沖。此脈沖在細胞膜上產生瞬時的跨膜電勢差,破壞膜脂雙層的分子排列,形成一系列平均直徑約10納米的穿透性微孔,為外源質粒或寡核苷酸提供直接穿膜通道。Bio-Rad的PulseTrac電路和電弧保護功能可有效減少電弧,確保珍貴樣品不受損失在脈沖結束后,細胞膜的流動性驅動這些微孔迅速重組關閉。得益于伯樂電穿孔儀1652100對峰值電壓、放電電容及時間常數的精準控制,目標細胞在恢復活性后,可完成外源基因的高效表達或穩定整合。
核心參數與輸出波形解析:指數衰減波與方波的雙重覆蓋
作為一款聚焦于微生物基因導入的專用電穿孔儀,其技術指標覆蓋了從細菌到酵母等多個物種的轉化需求。伯樂電穿孔儀1652100的波型輸出涵蓋帶RC時間常數的衰變或斜截衰變指數波型,并通過不同的模塊組合實現指數波與方波切換。
以下核心規格為用戶提供了精確的調試依據:
二、參數維度具體規格
波型品類可產生指數波和方波細胞類型全覆蓋(原核及真核)峰值輸出電壓3,000V(峰值)功率及負載>600W負載峰值電流100A
電壓調節范圍200–3,000V(連續可調,調節精度為10V)脈沖時間控制5ms默認值/手動1–4ms逐檔可調(調節精度0.1ms)電容區間(配合模塊)10μF至3,250μF范圍內可調(配合CE模塊)預設程序預設有5種類別的大腸桿菌和其他工程菌優化方案,以及5種酵母及絲狀真菌程序
顯示與控制大屏LCD數顯/微處理器控制/可存儲實驗方案
微生物基因導入適用范圍
為適配不同樣品的極限電域和電阻差異,伯樂電穿孔儀1652100的適用宿主范圍覆蓋分子生物學實驗室各項常規操作類型:該系統不僅包含大腸桿菌DH5α、BL21(DE3)等菌屬的標準轉化數據,也預存關于枯草芽孢桿菌、乳酸乳球菌、惡臭假單胞菌等工業底盤菌的優化方案。這些預設程序的電壓等級通過Bio-Rad15年以上的研發實驗數據驗證得出,可避免了手調參數時可能產生的樣品報廢。
配套的電擊杯涵蓋0.1cm、0.2cm和0.4cm三種電極間距規格。其中,0.1cm間距電擊杯多用于大腸桿菌等高電導率樣品,電壓推薦值約1800–2500V;而0.4cm杯間距可降低樣品中的離子強度需求,適宜于電轉緩沖液析出或鹽分較高的情況,可有效減少樣品在電極間的電弧飛濺。
智能化控制與數據記錄系統
伯樂電穿孔儀1652100搭載人性化的LCD大屏數顯系統和觸控按鈕。用戶無需連接電腦即可快速調出預存的內置選擇程序(全屏數字引導面板)。整套系統內置微處理器支持存儲實驗的脈沖參數,便于各Sanger測序部和研發端快速調取原條件,減少批間誤差。
儀器還提供基于脈沖前樣品電阻自動測量模式,以及具有保護的電弧自動保險檢測功能。當電極槽存在異常負荷或電擊杯中鹽分超標時,電弧抑制系統會提前采取保護回路,拒止高壓啟動。這種精準的安全保障組件給新手使用或早期工藝摸索提供了直觀的容錯空間,也進一步保護了實驗室內伯樂電穿孔儀1652100的長期硬件穩定性。
三、預優化程序對應的適用菌株
伯樂電穿孔儀1652100預存的5種(或以上)細菌優化程序主要覆蓋商業以及基礎研究常用的菌種類型:
大腸桿菌(E.coli):覆蓋DH10B、DH5α、BL21等細胞系,推薦的穿孔參數與后續抗生素/藍白斑篩選過程兼容。
農桿菌(Agrobacterium):包括C58及其他重要的植物轉基因工程菌株,在形成植物瞬時表達系統時,多數帶有改良的二元載體跨物種轉化。
惡臭假單胞菌/芽孢桿菌:適用于環境微生物蛋白表達及其在合成催化環節的途徑優化。
此外,該型號還針對酵母預存5種真菌優化方案,包括釀酒酵母(S.cerevisiae)以及畢赤酵母(P.pastoris)、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomycespombe)等極性畢赤系統的分子改造。這種預置設定讓伯樂電穿孔儀1652100直接成為微生物基因組文庫的電轉助手和細胞電擊融合過程的工具。
四、使用與操作指南
為了充分發揮伯樂電穿孔儀1652100的性能,以下標準操作流程可供微生物實驗室參考。
前期準備(感受態細胞)
細胞活化:取對數生長期的新鮮細菌或酵母菌(OD400調節至0.5–0.8之間),以4°C、低速離心(如4,000×g)收集菌體。
脫離子洗滌:棄上清后使用冰浴冷卻的滅菌超純水或10%滅菌甘油溶液逐步洗滌細胞沉淀2–3輪,去除殘留鹽離子,以防止電擊時因鹽分導電過高而導致高壓電弧損傷樣本。
懸菌密度:將細胞最終重懸在含10%甘油的冰冷緩沖液中,調節至終濃度大約1×10?–4×101?細菌/mL(或酵母更高濃度)。
電轉參數匹配與脈沖釋放
DNA加入:在預冷的0.2cm電極間距電擊杯內依次加入50μL的感受態菌體懸液和約1–5μL高純度質粒(DNA終濃度保持1–10ng/μL),吹打混勻且盡量保證無氣泡。
加載參數:根據菌種類型選擇相匹配的優化程序(例如E.coli推薦1.8–2.5kV/25μF:時間常數通常在4.5–5.0毫秒之間)。
安全互動界面:電擊前再次檢查觸點及干燥度;隨后點擊啟動鍵。電穿孔過程瞬間完成,屏幕會穩定顯示實測電壓和放電回路常數用于記錄可重復性。
后處理復蘇與菌液涂板
液體復蘇:取出電擊杯后迅速加入1mL室溫SOC或LB培養液,轉移至錐形培養管中,于37°C低轉速振蕩復蘇1小時,幫助膜修復和抗性蛋白表達。
平板培養:將50–300μL轉化菌懸液均勻涂布于含有適當抗生素的瓊脂平板中,次日統計陽性克隆率及轉化效率。
五、優勢特點與應用場景
相比傳統CaCl?化學法轉化,伯樂電穿孔儀1652100的轉化效率可高出1–2個數量級,特別適用于構建高通量突變文庫或CRISPR介導的原核基因敲除。受益于單鍵式脈沖激發、附著的電擊杯槽及快速充電等特點,其體積小巧(重量僅2.9kg,外部尺寸29×21×8cm),能夠靈活嵌入通風櫥或超凈臺并支持一觸即發的高速樣品周轉。
該型號還廣泛應用于真核生物的同源重組系統改造,包括酵母雙雜交載體轉化、工業益生菌(乳桿菌/雙歧桿菌)的生理機制研究和放線菌次級代謝產物的生物合成簇重建。
六、選型參考
與進階型GenePulserXcellTM系列相比,伯樂電穿孔儀1652100在保持較好拓展能力(可選配CE模塊和PC模塊)的同時,更側重于傳統微生物的電轉需求;對于無需方波或高電壓大容量哺乳動物細胞融合方案的基礎分子實驗室與合成生物學團隊而言,該型號以更友好的成本交換,提供了一套靈活且可便攜轉移的臺式轉化工具。
伯樂電穿孔儀1652100憑借其200–3,000V的寬電壓調節范圍、指數衰減波輸出以及10組預置的微生物優化程序,成為適合日常細菌與酵母高頻基因遞送的可靠工具。其PulseTrac電弧抑制電路有效保障了珍貴樣品的完整性,避免高壓操作發生不可逆的細胞灼傷。0.1cm、0.2cm和0.4cm三種標準電擊杯間距的設置,也為科研人員靈活應對鹽度適應性需求,提供了穩定的批間重現性。根據日常所涉及的宿主類型(革蘭陰性/陽性工程菌、酵母突變庫以及對電壓敏感的真核初級換液細胞),合理配置電擊杯間距和上限閾值,并遵從冰預冷的規范離心洗滌周期,將為后續的轉化子篩選提供持續且可預期的轉化效率。