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更新時間:2026-05-07
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Qubit熒光計報價-Qubit熒光劑價格
在下一代測序文庫制備、實時定量PCR模板構建及蛋白質功能研究等前沿實驗中,樣品濃度的準確定量是決定下游成敗的首要環節。面對珍貴且稀有的微量樣本,或存在于復雜污染物體系中的目標分子,傳統的紫外吸光度法往往因缺乏選擇性而給出“虛高"讀數。Qubit熒光計作為新一代專用的臺式熒光檢測平臺,憑借其基于熒光染料特異性結合的檢測原理,可在游離核苷酸、蛋白質或鹽類共存的惡劣環境中精準捕獲靶分子(DNA、RNA或蛋白質)的真實濃度。儀器的單樣品檢測模式與低至1微升的樣品消耗設計,使其成為處理痕量或昂貴樣本的理想選擇。配合內置的試劑計算器與多樣化的數據導出方式,Qubit熒光計(特別是當前主流的Qubit4.0與Qubit3.0型號)從根本上解決了一直以來困擾傳統定量方法靈敏度不足與背景信號干擾的問題,為等關鍵實驗提供更為可靠的質控基石。
一、核心技術原理:熒光染料的選擇性“標簽"與精準校準
Qubit熒光計的Qubit3.0與Qubit4.0在檢測邏輯上遵循著經典的熒光滴定路線,其基本的運行原理是Qubit讀取系統對高熒光信號的采集與轉換方式。整個定量流程核心分為兩個部分:樣本工作液建立與軟件系統對標——標準曲線下的定量計算。
Qubit熒光計的工作原理秉承并不斷深化創新,其核心奧秘在于配套的Invitrogen™Qubit®檢測試劑盒。每一套Qubit檢測體系都含有專為特定靶標設計的MolecularProbes®熒光染料。這類染料具備親和選擇性:它們只會在與特定生物分子結合時才會發射熒光信號。例如,QubitdsDNAHS檢測試劑盒里的熒光染料,能夠在存在等量RNA干擾的環境中,只與雙鏈DNA結合,排除假陽性干擾。
檢測開始后,實驗人員首先制備兩管即用型標準品溶液(試劑盒附帶標準品),連同待測樣品管一起放入Qubit熒光計。Qubit4.0基于熒光強度與靶分子濃度成正比的規律,通過高靈敏度光學元件檢測樣品與繪制已知濃度標準品(Q1,Q2)對應的標準曲線來計算未知樣本濃度:即運行中的“檢測未知待測樣本"環節,大幅提高了下游轉染或基因編輯實驗的把握。這種檢測技術不受樣品中可能存在的其他雜質分子影響,熒光強度與樣品中的靶分子濃度相對應。Qubit熒光計可檢測Qubit檢測試劑盒中與樣本中靶分子高度特異性結合的熒光染料。這些染料只有與靶標結合時才會發射熒光信號、即使靶分子濃度較低時亦是,因此可提供靈敏的讀數。Qubit技術只檢測靶分子(而不是污染物)的濃度,這種特異性可以獲得更精確的結果,DNA和RNA定量特異性和靈敏度均達到行業認可水平。
二、核心檢測參數與靈敏度優勢
Qubit熒光計在定量靈敏度方面展現出了相比于傳統紫外分光光度法的顯著性能優勢。Qubit4.0在檢測低濃度核酸時表現尤為突出,其檢測限可達10pg/μL的DNA或12.5μg/mL的蛋白質。Qubit3.0同樣具備這一高靈敏度檢測能力,能夠準確定量濃度僅為10pg/μL的DNA和12.5μg/mL的蛋白。這一靈敏度水平使Qubit熒光計在檢測微量樣本(如單細胞測序前的gDNA定量、cfDNA等)時相比傳統紫外吸收法(檢測下限2-5ng/μL)高出約2-3個數量級。
在選擇性方面,Qubit熒光計的檢測優勢源于其靶向性熒光染料。傳統的紫外吸光法不具選擇性,測量260nm所有分子的吸光值——包含DNA、RNA、蛋白質、游離核苷酸或多余的鹽離子,導致濃度高估。反觀Qubit熒光計,其分析試劑盒里的熒光染料只與樣品中的特異分子結合——DNA、RNA或蛋白,避免不準確測量帶來的重復工作。Qubit熒光計能夠區分雙鏈DNA(dsDNA)、單鏈DNA(ssDNA)和RNA,甚至能夠評估RNA的完整性和質量,這種高選擇性使Qubit在需要高特異性測量的實驗中具有明顯優勢。
Qubit4.0還配備了雙核處理器,可在5秒內快速準確地計算出DNA、RNA或蛋白質樣品的濃度。Qubit熒光計最多可存儲1000個樣品結果,實驗人員可以通過U盤導出,也可以使用USB連接線直接與電腦相連。更進一步的,帶WiFi功能的Qubit4還支持通過無線或云連接靈活地導出數據,以便輕松訪問定量數據。部分采用專業軟件升級的儀器還可選配符合21CFRPart11規范的合規數據管理模塊,滿足實驗室GLP/GMP環境的電子簽名與審計追蹤要求。
三、RNAIQ即時質量評估:快速區分完整與降解RNA
Qubit4.0的升級亮點聚焦于全新的RNAIQ(Integrity&Quality)檢測功能。該檢測使用兩種獨特的熒光染料:一種與大片段、完整性好或具有高級結構的RNA分子結合,另一種選擇性與小片段、降解的RNA進行結合。通過兩種染料的結合使用,Qubit可在僅需1微升樣品的情況下,快速評估RNA樣品的質量和完整性,檢測結果以RNAIQ數值形式呈現。
與傳統基于微流體芯片法的檢測方法相比,QubitRNAIQ法所需的設備成本低,操作簡單,更重要的是檢測所需的時間大大縮短。通常來說,完成12個樣品的檢測,RNAIQ法約需要10分鐘,而使用微流體法,約需要75分鐘。對于只需要快速評估RNA樣品是否降解的日常質控場景,Qubit4.0的RNAIQ功能可大幅提高樣品質控環節的時間效率。
四、Qubit應用場景與核心價值
Qubit熒光計在多個關鍵實驗場景中發揮著核心的樣本質控作用,尤其適用于以下幾種情況:
樣品十分稀有且難以處理:僅需1微升樣品即可測量,避免珍貴樣品不必要的耗損
提取后的核酸或蛋白質量很少:在低濃度下亦具有高靈敏度和準確性
樣品將用于成本昂貴或周期較長的下游實驗:避免因定量不準導致的實驗失敗風險
樣品制備過程復雜,需要特殊技術:如激光顯微切割(LCM)等
NGS文庫定量的起始質控基準
在現代NGS工作流程中,Qubit熒光計是文庫構建過程里定量工具。它對dsDNA的高度選擇性可有效排除反應體系中游離引物、接頭二聚體等雜質對定量結果的干擾,確保計算混合文庫池濃度時上機測序的準確性與產出均一化。文獻數據顯示,在2013年發表的一篇PLoSOne研究中,Simbolo等人報道Qubit熒光定量是一種可靠且高性價比的方法,可用于鑒定各種NGSDNA制備物,包括冷凍組織和FFPE樣品中的DNA。在他們測試過的儀器中,數據顯示使用Qubit熒光計獲取的DNA定量結果有著較高的重現性,并與DNA定量分析的qPCR數據一致,即使是對FFPE樣品中部分降解的DNA來說也是一樣。
Qubit4.0相較于前代加入的高速雙核處理器提升了數據吞吐量與讀值穩定性,使得該項定量過程幾分鐘內即可結束,這為后續qPCR精確質檢前提供了一個快捷、潔凈的且可溯源的出發點。
蛋白質分析與WesternBlot樣品預處理
對準備進行蛋白質印跡或酶活性測定的樣品池進行精確定量時,Qubit熒光計配備專用的Qubit蛋白定量檢測試劑盒。其預先優化的檢測方案可適應十二烷基、二硫蘇糖醇等常用裂解緩沖液的干擾,動態范圍可滿足12.5μg/mL至5mg/mL(常規定量),甚至更高濃度的需求。這可以確保SDS-PAGE凝膠各泳道蛋白上樣量均一,提高免疫印跡靶標條帶信號的可比性與分析結論的說服力。
活細胞與細胞治療產品開發
結合Qubit的細胞活性試劑盒(如ReadyCountGreen/Red染料),在細胞治療和CAR-T細胞培養等前沿研發中,Qubit的雙波長熒光檢測可實現非同尋常的混合細胞群活/死細胞區分,克服了傳統臺盼藍法對PBMC等小細胞判讀困難的局限。
Qubit熒光計與紫外分光光度計的互補關系
在分光光度測量領域,Qubit熒光計與紫外分光光度計(如NanoDropOne)在實驗室定量工作中各自具備不可替代的價值,Qubit的長處在于特異性、準確度和低豐度靶標的精確定量;紫外分光法則在批次樣品純度(A260/A280、A260/A230比值)快速篩查以及獲取初步濃度估算(尤其高濃度純化產物)等方面具有成本以及時間優勢。建議的用戶工作流程往往是:進入NGS流程或蛋白結構分析之前,先將樣品通過紫外分光光度計進行快速初步篩查,確定大致濃度和污染可能性;隨后對最終上機測序或轉染級樣本用Qubit執行最后一次精準濃度定量,以獲得更全面且可靠的樣品前處理質控報告。
五、選型參考:Qubit4.0與3.0的差異化選擇
在選型決策框架上,Qubit4.0與Qubit3.0的核心定量原理一致,均依賴高特異性熒光染料對核酸或蛋白質靶標的結合。由于技術上保留了相同的光學模塊與配套試劑體系,用戶可依據原始實驗預算、量產或實驗室實際配置進行端到端的銜接。若需要便于遠程及無線化數據管理功能(WiFi導出及云端存儲),推薦優選搭載了云連接組件的Qubit4.0;若僅需開展常規快速定量檢測且實驗室的數據基礎設施已經成熟并支持有線連接,Qubit3.0以同樣的檢測精度和較少的成本投入,適配基礎科研型的小規模實驗室。
總結
綜上所述,Qubit熒光計(Qubit4.0與Qubit3.0)憑借其熒光染料特異性結合原理、低至10pg/μL的高靈敏度以及微量樣品消耗等特點,為各類基因組學、蛋白組學及細胞生物學實驗提供了精準可靠的定量保障。無論是NGS文庫構建前的精準定量、RNA完整性快速評估,還是蛋白質分析的濃度校準,Qubit均能提供可信賴的數據支持。根據實驗室的通量需求、數據管理方式和預算條件選擇合適的型號,并遵循規范的試劑存儲與操作流程,將有助于提升樣品質控環節的效率與下游實驗的成功率。