進口熒光計丨Qubit4.0熒光定量儀

    在NGS文庫質(zhì)控、qPCR模板精準(zhǔn)測定及蛋白質(zhì)分析等敏感下游實驗中，樣品濃度的準(zhǔn)確定量是實驗成功的關(guān)鍵前提。Qubit4.0熒光定量儀作為Invitrogen™第四代臺式熒光計，采用專門研制的熒光檢測技術(shù)，通過熒光染料與靶分子特異性結(jié)合實現(xiàn)精準(zhǔn)定量，即使在存在游離核苷酸或降解核酸等污染物的情況下，仍能獲得可靠結(jié)果。其高靈敏度與微量樣本兼容性，使其在處理珍貴或復(fù)雜樣品時成為理想選擇。

    選擇Qubit4.0熒光定量儀，意味著為您的樣品質(zhì)控流程選擇了一份經(jīng)過全球大量文獻驗證的精準(zhǔn)定量工具。

核心原理：熒光特異性結(jié)合，消除雜質(zhì)干擾

    Qubit4.0熒光定量儀的核心優(yōu)勢在于其高度特異性的熒光檢測原理。與傳統(tǒng)紫外分光光度法不同，該儀器采用專門研制的熒光染料，這些染料只有與特異性靶分子（如dsDNA、ssDNA、RNA或蛋白質(zhì)）結(jié)合時才能發(fā)射熒光信號。即使樣本中存在游離核苷酸、降解核酸或過量鹽類等常見污染物，這些染料仍能精準(zhǔn)識別并定量目標(biāo)分子。

    這一技術(shù)特性使其在低濃度下具有較高的DNA和RNA定量特異性和靈敏度。與傳統(tǒng)紫外吸光度法相比，Qubit4.0熒光定量儀的靈敏度高出數(shù)個數(shù)量級，在檢測低濃度樣本時優(yōu)勢明顯，尤其適合處理濃度低于10ng/μL的痕量樣品。

    Qubit4.0熒光定量儀的一項核心功能是RNAIQ（完整性和質(zhì)量）檢測。該檢測使用兩種獨特的熒光染料：一種與大的、完整的RNA分子結(jié)合，另一種與小的、降解的RNA選擇性結(jié)合。通過兩種染料的結(jié)合使用，僅需兩個簡單步驟即可準(zhǔn)確區(qū)分完整RNA與降解RNA。

    檢測結(jié)果以RNAIQ#值表示（范圍1-10）。較高的IQ值表明樣品主要由大片段RNA或具有高級結(jié)構(gòu)的RNA組成；較低的IQ值則提示樣品可能已發(fā)生降解，含有較多小片段RNA。

    與傳統(tǒng)凝膠電泳或毛細(xì)管電泳法相比，RNAIQ檢測每份樣品僅需1μL樣本，檢測時間不到5秒，大幅提升了RNA質(zhì)控環(huán)節(jié)的工作效率。完成12個樣品的檢測，RNAIQ法約需10分鐘，而微流體法約需75分鐘。這一功能對于只需要快速評估RNA樣品是否降解的日常質(zhì)控場景尤為實用。

兼容的檢測試劑盒

    Qubit4.0熒光定量儀兼容多種Qubit檢測試劑盒，涵蓋DNA、RNA、microRNA和蛋白質(zhì)等靶標(biāo)：

    快速簡便的操作流程

    Qubit4.0熒光定量儀的操作流程極為簡潔：

    開機預(yù)熱（<35秒），選擇對應(yīng)檢測程序

    根據(jù)內(nèi)置試劑計算器提示，按比例混合染料與緩沖液制備工作溶液

    將1-20μL樣品加入工作溶液中，混勻后室溫孵育

    插入Qubit檢測管，儀器自動讀取并顯示結(jié)果

    DNA和RNA檢測僅需孵育2分鐘，每份樣品讀取時間不到3秒；蛋白質(zhì)檢測約需10-15分鐘。5.7英寸彩色觸摸屏提供直觀的導(dǎo)航菜單，支持包括簡體中文在內(nèi)的7種語言界面，新用戶可快速上手。

與NanoDrop的功能互補關(guān)系

    Qubit4.0熒光定量儀與NanoDrop紫外分光光度計是功能互補而非相互替代的工具，兩者在實驗室定量工作中各有側(cè)重。

    Qubit4.0的核心優(yōu)勢在于高靈敏度和高特異性。其檢測下限遠低于紫外吸收法（可檢測0.5pg/μL的低濃度樣品），且?guī)缀醪皇苡坞x核苷酸、蛋白質(zhì)、鹽類等污染物干擾，適合處理痕量樣本（如單細(xì)胞測序、cfDNA）及含污染物的樣本。

    紫外吸收法的優(yōu)勢在于快速檢測（無需染料孵育），可同時評估樣品純度（A260/A280、A260/A230比值），適合高純度樣本的快速估算和初步篩查。

    建議的工作流程：許多實驗室采用Qubit4.0熒光定量儀與NanoDrop配合使用的策略——先用NanoDrop快速評估樣品中是否存在污染物，獲取大致濃度范圍和純度信息；再對需要用于關(guān)鍵下游實驗的樣本用Qubit進行精確定量。這種組合策略既利用了紫外分光法快速檢測雜質(zhì)的能力，又發(fā)揮了熒光法的特異性和靈敏度優(yōu)勢。

    滿足多元化的實驗需求

    Qubit4.0熒光定量儀適用于多個生命科學(xué)研究與臨床檢測領(lǐng)域的樣品質(zhì)控場景。

    NGS文庫定量與質(zhì)控：在下一代測序流程中，文庫的準(zhǔn)確定量是保證測序數(shù)據(jù)質(zhì)量的關(guān)鍵。Qubit4.0熒光定量儀對dsDNA具有選擇性，即使存在等量的RNA情況亦是如此，能夠精準(zhǔn)測量文庫濃度。研究數(shù)據(jù)表明，使用該儀器獲取的DNA定量結(jié)果與qPCR數(shù)據(jù)高度一致，尤其適用于FFPE樣品中部分降解的DNA定量。

    實時熒光定量PCR：準(zhǔn)確定量模板DNA或cDNA是獲得可靠Ct值的前提。Qubit4.0熒光定量儀可為qPCR實驗提供精確的模板濃度參考，確保不同批次間的實驗結(jié)果具有可比性。

    珍貴微量樣本：對于從稀有樣本中提取的DNA、ChIP后的DNA、單細(xì)胞RNA等珍貴樣品，傳統(tǒng)紫外法難以準(zhǔn)確測量。Qubit4.0熒光定量儀的僅需1μL樣品即可完成檢測的特性，使其成為這類樣本的理想選擇。

    蛋白質(zhì)定量分析：在Westernblot、免疫檢測等蛋白質(zhì)分析實驗中，準(zhǔn)確的總蛋白濃度是確保上樣量一致性的基礎(chǔ)。Qubit蛋白檢測試劑盒可精準(zhǔn)定量12.5μg/mL至5mg/mL范圍內(nèi)的樣品，對還原試劑（如DTT、β-巰基乙醇）等常見污染物具有良好的耐受性。

    智能化數(shù)據(jù)管理

    Qubit4.0熒光定量儀最多可存儲1000個樣品結(jié)果，數(shù)據(jù)導(dǎo)出方式靈活多樣：

    使用隨附的WiFi無線傳輸至ThermoFisherConnect云賬戶，實現(xiàn)遠程數(shù)據(jù)管理與團隊協(xié)作

    通過USB驅(qū)動器直接導(dǎo)出數(shù)據(jù)至計算機

    通過USB連接線直接傳輸數(shù)據(jù)至Excel軟件

    所有數(shù)據(jù)均可保存在云端應(yīng)用程序中，便于長期管理和跨設(shè)備訪問。

總結(jié)

    綜上所述，進口熒光劑丨Qubit4.0熒光定量儀憑借其高度特異性的熒光檢測原理、低至0.01ng/μL的檢測靈敏度以及RNAIQ完整性評估等創(chuàng)新功能，成為核酸與蛋白質(zhì)定量的可靠選擇。無論是NGS文庫質(zhì)控、qPCR模板定量、珍貴微量樣本分析，還是RNA完整性快速評估，這款設(shè)備都能提供穩(wěn)定可靠的數(shù)據(jù)支持。根據(jù)您的具體樣本類型與應(yīng)用場景選擇合適的檢測試劑盒，并遵循規(guī)范的操作流程，將有助于提升樣品質(zhì)控工作的效率與數(shù)據(jù)可靠性。